?????? 傳統(tǒng)的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑有一定的細胞毒性，在轉(zhuǎn)染過程由于提高細胞的通透性因而不能在培養(yǎng)基中添加抗生素。帶正電的脂質(zhì)體與核酸帶負電的磷酸基團形成復(fù)合物被細胞內(nèi)吞。血清中含有大量的蛋白質(zhì)，在轉(zhuǎn)染過程中，帶負電的蛋白質(zhì)可能干擾陽離子脂質(zhì)體對核酸的吸附，影響轉(zhuǎn)染效率。另外，使用脂質(zhì)體等轉(zhuǎn)染試劑時，由于含血清轉(zhuǎn)染會將血清中的蛋白帶入細胞，引發(fā)細胞毒性，導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率降低，故不能有血清轉(zhuǎn)染。這些轉(zhuǎn)染試劑要求在轉(zhuǎn)染前換無血清培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染后4-6h在更換成有血清培養(yǎng)基，這其實是為了減輕轉(zhuǎn)染造成的細胞毒性。


?????? 不同的細胞及轉(zhuǎn)染試劑要求轉(zhuǎn)染的條件是不同 的。最好是在第一次實驗前做一個預(yù)實驗，比如：HeLa，293，CHO，COS7，MCF－7，HepG2等細胞，是否加血清，對不同的細胞是有不同的影響的，有些細胞是可以有血清的，有些加血清就會受影響。所以，普通的轉(zhuǎn)染試劑一定要進行預(yù)實驗，和條件優(yōu)化。


????? 轉(zhuǎn)染后在6小時左右最好換液且換為有血清的培養(yǎng)基，其一因為普通轉(zhuǎn)染試劑對細胞的毒性作用大，其二可降低因血清的缺乏引起的細胞的死亡。轉(zhuǎn)染時不加血清是防止血清的干擾作用，轉(zhuǎn)染后可適時加入。加入過早會引起未轉(zhuǎn)染細胞的優(yōu)勢生長，過晚會引起較多細胞死亡?？蓪崟r觀察1/5細胞變圓的時候加入血清。

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