產(chǎn)品應(yīng)用

操作步驟：

1. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：

a)對于貼壁細(xì)胞：

       小心收集細(xì)胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，至細(xì)胞可以被輕輕用移液管
或槍頭吹打下來時，加入前面收集的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下所有的貼壁細(xì)胞，并輕輕吹散細(xì)胞。再次收集到離心管內(nèi)。
1000rpm左右離心5min，沉淀細(xì)胞。對于特定的細(xì)胞，如果細(xì)胞無法完全離心至離心管底，可以適當(dāng)延長離心時間或
稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50µl左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細(xì)胞。加入約1ml 4℃預(yù)冷的PBS，重懸
細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞，小心吸除上清。

b)對于懸浮細(xì)胞：

       1000rpm左右離心5min，沉淀細(xì)胞。對于特定的細(xì)胞，如果細(xì)胞無法完全離心至離心管底，可以適
當(dāng)延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50µl左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細(xì)胞。加入約1ml 4℃
預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞，小心吸除上清。

2. 用去離子水按1:3稀釋結(jié)合緩沖液(4ml 4x結(jié)合緩沖液+12ml去離子水)；

3. 用1x結(jié)合緩沖液重新懸浮細(xì)胞，調(diào)節(jié)其濃度為1-5×10E6/ml；

4. 取100µl的細(xì)胞懸液于5ml流式管中，加入5µl Annexin V/FITC混勻后于室溫避光孵育5分鐘；

5. 加入10µl 20ug/ml的碘化丙錠溶液(PI)，并加400µl PBS，立刻進(jìn)行流式檢測。